城市自來水一般經(jīng)過沉淀、過濾及消毒等處理，含有的微生物較少，但當(dāng)處理工藝不合理或者處理過程中造成污染等都會導(dǎo)致生活用水的二次污染，因此，加強(qiáng)生活飲用水的日常檢測十分必要。微生物檢測是生活污水監(jiān)測中的重要內(nèi)容。
根據(jù)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB5749-2006）中的水質(zhì)常規(guī)指標(biāo)，微生物指標(biāo)中一般檢測總大腸菌群和細(xì)菌總數(shù)兩項(xiàng)指標(biāo)，當(dāng)檢出總大腸菌群時(shí)，需進(jìn)一步檢測耐熱大腸菌群和大腸埃希氏菌。
總大腸菌群的檢測步驟：
生活飲用水:以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1ml充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中，總大腸菌群指一群在37℃溫度下培養(yǎng)24h能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
總大腸菌群代表了一大群有共同性質(zhì)的革蘭氏陰性、桿狀細(xì)菌。這個(gè)菌群包括耐熱大腸桿菌和以糞便為來源的細(xì)菌，也包括一些來自環(huán)境本身的細(xì)菌。
因此總大腸菌群的存在可能不指示糞便污染。在極端的情況下，有高數(shù)量的總大腸菌群可能同時(shí)有低數(shù)量甚至零的耐熱大腸桿菌。這樣的結(jié)果并不一定代表糞便污染的存在。有可能是因?yàn)檫M(jìn)入水體的土壤或者有機(jī)物或者在一定的條件下適合其他種類的大腸細(xì)菌的生長?？偟膩碚f，總大腸菌群在 35°C 或者 37°C 的溫度下，含有乳酸的培養(yǎng)基里面或者上面生長。
總大腸菌群濾膜法是指用孔徑為0.45um的微孔濾膜過濾水樣，將濾膜貼在添加乳糖的選擇隆培養(yǎng)基上在37℃條件下培養(yǎng)24h，能形成特征性菌落的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌以檢測水中總大腸菌群的方法。
1、培養(yǎng)基與試劑
總大腸菌群無色培養(yǎng)基是我公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸菌群的快速檢測。
2、培養(yǎng)基的制備
取一管總大腸菌群培養(yǎng)基，溶于另50ml無菌蒸餾水，加熱溶解，煮沸1min，在實(shí)驗(yàn)室條件下可121℃高壓滅菌15分鐘。使用時(shí)加3mL～5mL于滅菌吸收墊上,以剛浸沒吸收墊為準(zhǔn)，再將濾膜置于培養(yǎng)墊上培養(yǎng)。
3、水樣過濾
撕開滅菌濾膜的包裝袋，用無菌鑷子（火焰滅菌器滅菌）夾取滅菌濾膜邊緣部分，將粗糙面向上，貼放在已滅菌的濾頭（火焰滅菌器滅菌）上，固定好過濾杯，將100mL水樣（如水樣含菌數(shù)較多，可減少過濾水樣量，或?qū)⑺畼酉♂專┳⑷脒^濾杯中，接上12V電池，抽濾。
4、培養(yǎng)
水樣過濾完后，再抽氣約5s，取下過濾杯，用滅菌鑷子夾取濾膜邊緣部分。移放在總大腸菌群培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將平皿蓋好，放入37℃ 恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)24h士2h。
5、結(jié)果觀察與報(bào)告
將培養(yǎng)后的平板取出觀察，大腸菌群菌落在無色培養(yǎng)基上為白色，如上圖。
計(jì)數(shù)培養(yǎng)基上大腸菌群菌落數(shù)，水中大腸菌群數(shù)以100ml水樣中大腸菌群菌落形成單位（CFU）表示，公式如下：
總大腸菌群菌落數(shù)（CFU／100ml)=數(shù)出的總大腸菌群數(shù)*100/過濾的水樣體積（ml）
大腸桿菌|微生物|總大腸菌群檢測儀產(chǎn)品鏈接：http://www.qingdaohaijing.com/szcgjcy/217.html
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